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人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)检测——EVO视讯试剂盒说明书

来源:范芳梦 日期:2025-03-04

EVO视讯的巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒仅供科学研究使用,禁止用于医学诊断。以下是本试剂盒的使用说明及检测原理。

人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)检测——EVO视讯试剂盒说明书

本试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术。检测过程的第一步为将样本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入已预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,经过适当温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,随后在酸的作用下变为最终的黄色。样品中adropin(AD)的浓度与颜色深浅呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并计算样本浓度。

对于样本的收集、处理及保存,须遵循以下方法:

  • 血清:使用不含热原和内毒素的管子,避免细胞刺激,采血后在3000转离心10分钟内迅速小心分离血清和红细胞。
  • 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,然后在3000转离心30分钟后取上清。
  • 细胞上清液:在3000转离心10分钟后去除颗粒和聚合物。
  • 组织匀浆:将组织与生理盐水混合捣碎,3000转离心10分钟后取上清。
  • 保存:若样品未及时检测,建议分装并冻存于-20℃,且应避免反复冻融,解冻时在室温下充分解冻并确保样品均匀。

在操作过程中,注意以下事项以提高试剂盒的使用效果。标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。准备20×洗涤缓冲液时,需将蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

实验结果的判断可以通过绘制标准曲线完成。在Excel中,以标准品浓度作为横坐标,OD值作为纵坐标绘制线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。

使用EVO视讯品牌的试剂盒,您可以在科研工作中获得可靠的结果。我们承诺提供高质量的产品,但不对使用结果承担任何责任。

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